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所属分类：输气工考试题库
【◆参考答案◆】：紫外线（uv）是物理诱变剂，它引起DNA结构改变的形式主要有：氢键断裂、DNA链断裂、水合作用、T二聚体形成等。用紫外线照射处理酵母菌的简单操作过程：用生理盐水制备酵母菌悬浮液→吸取约5ml菌悬液于无菌小型培养皿中→开启紫外线灯预热15分钟→将培养皿置于磁力搅拌器上→打开皿盖于暗室内照射处理酵母菌液一定时间（约30-60秒）→于红光下取0.5ml，在暗箱内经中间培养→稀释涂布平板→培养。
(2)【◆题库问题◆】：[问答题,简答题] 简述食用色素概念以及红曲色素的发酵方法和基本流程？
【◆参考答案◆】：食用色素：以食品着色和改善食品色泽为目的的食品添加剂。红曲色素的发酵方法有固体发酵法和液体深层发酵法。①固体发酵法：采用的多为"红曲通风制曲"工艺，优质大米经浸泡后沥干，蒸锅中蒸透，冷却至40℃时接入红曲霉菌并搅拌。此时品温30~35℃，将拌匀的曲料转入曲池，堆积升温，用麻袋盖住保温，待温度上升至50℃进行一次翻曲，料温下降至30℃左右，再堆积升温至40℃，进行第二次翻曲。将曲料搅拌后摊平地面，待料温上升至35℃利用电机进行通风制曲，然后将成熟的曲出池晒干或直接提取红曲霉素。②液体深层发酵法：液体发酵生产周期短，品质易于控制，是红曲色素大规模工业化生产的方向。液体深层培养以淀粉为碳源，硝酸钾或硝酸钠为氮源，pH5.5~6.0，发酵周期一般为50~60h。红曲霉菌是好氧菌，所以在深层培养时要提供足够的溶氧。然后将发酵液进行固液分离，滤渣用70%~80%的乙醇进行浸提，所得滤液与发酵液分离后的澄清滤液合并，回收乙醇后喷雾干燥。干燥时添加色素载体利于干燥进行。最后可取得红曲霉素。
(3)【◆题库问题◆】：[问答题,简答题] 生产中通过哪些措施延长稳定期？
【◆参考答案◆】：补料，调节T、pH、搅拌、通氧等。
(4)【◆题库问题◆】：[单选] 工业发酵中一般都采用（）的灭菌方法杀灭培养基中的有机物。
A．高压蒸汽灭菌
B．火焰灭菌
C．干热灭菌
D．常压灭菌
A．高压蒸汽灭菌
B．火焰灭菌
C．干热灭菌
D．常压灭菌
【◆参考答案◆】：A
(5)【◆题库问题◆】：[问答题] 什么是定位突变，常用的定位突变方法及其原理。
【◆参考答案◆】：
（1）定位突变：定位突变是在已知蛋白质结构与功能的基础上，在已知DNA序列中取代、插入或删除选定的核苷酸，从而产生具有新性状的突变蛋白质分子的一种蛋白质工程技术。
（2）
①寡核苷酸引物介导的定位突变：用含有突变碱基的寡核苷酸片段作引物，在聚合酶的作用下启动DNA分子进行复制。包括：Kunkel突变法、基于抗生素的"抗性恢复"突变法、基于去除特定限制酶切点的突变法
②PCR介导的定位突变法：利用PCR将插入和缺失的突变碱基均设计在引物中，先用两对引物分别对核酸进行PCR扩增，通过重叠延伸产生带有部分重叠序列的两种PCR产物，这些产物经过混合、变性、复性和链延伸后，再用一对与两个待接片段外侧互补的引物进行第二次扩增，从而产生全长的异源杂合双链DNA。
③盒式突变：又称片段取代法，利用目标基因序列中适当限制酶切位点，插入各种合适的突变DNA片段，用以取代目标基因中特定DNA片段。包括盒式取代诱变和混合寡核苷酸诱变两种方式。
（1）定位突变：定位突变是在已知蛋白质结构与功能的基础上，在已知DNA序列中取代、插入或删除选定的核苷酸，从而产生具有新性状的突变蛋白质分子的一种蛋白质工程技术。
（2）
①寡核苷酸引物介导的定位突变：用含有突变碱基的寡核苷酸片段作引物，在聚合酶的作用下启动DNA分子进行复制。包括：Kunkel突变法、基于抗生素的"抗性恢复"突变法、基于去除特定限制酶切点的突变法
②PCR介导的定位突变法：利用PCR将插入和缺失的突变碱基均设计在引物中，先用两对引物分别对核酸进行PCR扩增，通过重叠延伸产生带有部分重叠序列的两种PCR产物，这些产物经过混合、变性、复性和链延伸后，再用一对与两个待接片段外侧互补的引物进行第二次扩增，从而产生全长的异源杂合双链DNA。
③盒式突变：又称片段取代法，利用目标基因序列中适当限制酶切位点，插入各种合适的突变DNA片段，用以取代目标基因中特定DNA片段。包括盒式取代诱变和混合寡核苷酸诱变两种方式。
(6)【◆题库问题◆】：[多选] 目前氨基酸的置换修饰行之有效的两个技术是（）
A．定位突变
B．旋转突变
C．联体突变
D．盒式突变
A．定位突变
B．旋转突变
C．联体突变
D．盒式突变
【◆参考答案◆】：A, D
(7)【◆题库问题◆】：[多选] 酶促反应中的抑制作用分为（）.
A．互助作用
B．不可逆抑制
C．可逆抑制
D．协同作用
A．互助作用
B．不可逆抑制
C．可逆抑制
D．协同作用
【◆参考答案◆】：B, C
(8)【◆题库问题◆】：[名词解释] DNA聚合酶
【◆参考答案◆】：
能够催化DNA复制和修复DNA分子损伤的一类酶，可在其催化下进行DNA体外合成反应DNA修饰酶：这类酶能对DNA分子进行一些比如3’末端加dNTP或5’末端添加/脱除磷酸基团等等的修饰T4噬菌体多核苷酸激酶：是一种能催化γ-磷酸从ATP分子转移给DNA或RNA分子的5’-OH末端的酶，它对底物分子长度没有限制。
能够催化DNA复制和修复DNA分子损伤的一类酶，可在其催化下进行DNA体外合成反应DNA修饰酶：这类酶能对DNA分子进行一些比如3’末端加dNTP或5’末端添加/脱除磷酸基团等等的修饰T4噬菌体多核苷酸激酶：是一种能催化γ-磷酸从ATP分子转移给DNA或RNA分子的5’-OH末端的酶，它对底物分子长度没有限制。
(9)【◆题库问题◆】：[问答题,简答题] 现拟从自然界中分离筛选出α-淀粉酶产量较高的枯草芽抱杆菌，试回答下列问题：（l）你认为应该到什么地方采集含此菌的样品较为适宜？（2）进行纯种分离时，为提高效率，根据该菌的何种特性可采用哪些相应的措施？（3）可采用哪些纯种分离方法？（4）在进行性能测定时，可采用何种简化的初筛方法？
【◆参考答案◆】：（l）应该到富含淀粉质的地方采集含此菌的样品。（2）根据该菌的耐热特性可采用将含菌样品加热80℃处理10min后，杀死不耐热杂菌，再进行纯种分离的相应措施。（3）可采用划线分离、稀释分离、刮棒连续涂布等纯种分离方法。（4）可采用平皿淀粉透明圈法进行初筛。
(10)【◆题库问题◆】：[多选] 酶工程在食品工业中的应用有（）.
A．用于啤酒的澄清
B．提高啤酒的持泡性
C．改进果酒的生产工艺
D．食品保鲜
A．用于啤酒的澄清
B．提高啤酒的持泡性
C．改进果酒的生产工艺
D．食品保鲜
【◆参考答案◆】：A, B, C, D
