厌氧微生物常用哪些纯培养技术？简述厌氧手套箱培养法的原理和操作过程。

(1)【◆题库问题◆】：[问答题,简答题] 厌氧微生物常用哪些纯培养技术？简述厌氧手套箱培养法的原理和操作过程。

【◆参考答案◆】：目前，已发展了很多厌氧微生物培养技术，有化学方法、物理方法、物理与化学相结合的方法，如真空干燥器化学吸氧法、厌氧罐培养法、厌氧手套箱培养法、厌氧发生袋培养法、庖肉培养基法、亨盖特氏（HungatE.厌氧技术等。厌氧手套箱是利用通入的氢气，在箱内黑色钯粒的催化下，与氧结合生成水的反应，达到除去箱内氧的目的。厌氧箱可分为操作室和交换室两部分。操作室用于进行厌氧操作，前面有一对供操作用的套袖及胶皮手套。操作室内的常温钯粒和干燥剂用钢丝网分别装着，并与电风扇组装在一起，不断除去操作室内的氧及所形成的水分。操作室内还备有接种针和用于接种针灭菌的电热器，有的还安装有培养箱。交换室是用于室外物品的放入和室内物品的取出。交换室又与真空泵及混合气钢瓶相连。混合气体体积分数一般为10%CO2、5%～10%H2和80%～85%高纯N2。以平板法分离双歧杆菌的纯培养为例，厌氧手套箱的操作过程：厌氧箱的准备→培养物的准备→换混合气培养→观察挑取菌落。

(2)【◆题库问题◆】：[单选] 下列方法不属于湿热灭菌法的是（）.
A．巴士灭菌法
B．火焰灭菌法
C．煮沸灭菌法
D．高压蒸汽灭菌法

【◆参考答案◆】：B

(3)【◆题库问题◆】：[问答题] 限制性内切核酸酶的特点与使用注意事项有哪些？

【◆参考答案◆】：
一类专门切割DNA的酶，它们能特异结合一段被称为限制酶识别顺序的特殊DNA序列。并切割dsDNA。
所谓限制（restriction）=切割（clearagE.=水解（hydrolysis）该部位的核苷键（磷酸二酯键）限制酶都是从原核生物中发现的（400多种E/350M）。所有的限制酶可分成3类。
（1）Ⅰ、Ⅲ型，兼具限制与修饰活性，它们识别与切割顺序不在一个地方，不产生特异性的DNA片段，与基因工程意义不大（有说Ⅲ型识别核苷酸切割的位点一致，但罕见）。
（2）Ⅱ型基因工程说到的限制酶是Ⅱ型酶，具有此类酶的微生物限制－修饰系统分别由限制酶和甲基化酶来完成。Ⅱ型酶分子量小，仅需Mg2+作为催化反应的辅因子，识别与切割位点相同，产生特异的DNA片段。

(4)【◆题库问题◆】：[填空题] 大豆中存在多种抗营养因子，如（）、血细胞凝集素、（）、致甲状腺肿素、（）等。

【◆参考答案◆】：胰蛋白酶抑制素；植酸；抗维生素因子

(5)【◆题库问题◆】：[填空题] 微生物细胞的培养中，根据控制方式的不同，连续培养可分为（）、（）两种。

【◆参考答案◆】：恒浊培养；恒化培养

(6)【◆题库问题◆】：[名词解释] 透析

【◆参考答案◆】：
穿过膜的选择性扩散过程。可用于分离分子量大小不同的溶质，低于膜所截留阈值分子量的物质可扩散穿过膜，高于膜截留阈值分子量的物质则被保留在半透膜的另一侧。

(7)【◆题库问题◆】：[名词解释] 冰晶最大生成带

【◆参考答案◆】：大多数冰晶体都是在-1℃～-4℃间形成的，称之为最大冰晶生成带。

(8)【◆题库问题◆】：[问答题,简答题] 冷害的概念。

【◆参考答案◆】：在冷却贮藏时，有些水果、蔬菜的品温虽然在冻结点以上，但当贮藏温度低于某一温度界限时，果、蔬的正常生理机制受到障碍，失去平衡，称为冷窖。

(9)【◆题库问题◆】：[单选] 下列哪种油料作物最易用基因工程的方法进行改造（）
A．大豆
B．向日葵
C．油棕榈
D．油菜

【◆参考答案◆】：D

(10)【◆题库问题◆】：[名词解释] 转化

【◆参考答案◆】：以质体作为载体构建的重组体导入受体细胞的过程。