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所属分类:地球科学题库
【◆参考答案◆】:D
(2)【◆题库问题◆】:[问答题] 细胞培养应注意哪些问题?
【◆参考答案◆】:
体外培养细胞必须注意三个环节:物质营养、生存环境和废物的排除。
体外培养细胞所需的营养是由培养基提供的。培养基通常含有细胞生长所需的氨基酸、维生素和微量元素。一般培养细胞所用的培养基是合成培养基,它含有细胞生长必需的营养成分:但是在使用合成培养基时需要添加一些天然成分,其中最重要的是血清,以牛血清为主。这是因为血清中含有多种促细胞生长因子和一些生物活性物质。
由于血清中含有一些不明成分,对于特殊目的细胞培养是不利的。为此,研究人员正在探索无血清培养细胞的条件,并已经取得一些进展。由于机体内的细胞生长通常需要不同的细胞因子进行调节,所以,在无血清培养时仍然需要添加必要的因子,包括促细胞生长因子(如EGF.,促贴附物(如层黏连蛋白)和其他活性物质(如转铁蛋白)。无血清培养排除了有血清培养时血清中不明因素的干扰,使实验结果更加可靠。
体外细胞培养必须模拟体内细胞生长的环境。环境因素主要是指无菌环境、合适的温度、一定的渗透压和气体环境。气体主要有两种,即O2和CO2。后者对于维持细胞培养液的酸碱度十分重要。
活体内生长的细胞所产生的代谢物和废物通过一定的系统进行利用和排除。体外培养细胞产生的代谢物和废物积累在培养液中,所以定期更换培养液,对于体外细胞培养也是至关重要的。
体外培养细胞必须注意三个环节:物质营养、生存环境和废物的排除。
体外培养细胞所需的营养是由培养基提供的。培养基通常含有细胞生长所需的氨基酸、维生素和微量元素。一般培养细胞所用的培养基是合成培养基,它含有细胞生长必需的营养成分:但是在使用合成培养基时需要添加一些天然成分,其中最重要的是血清,以牛血清为主。这是因为血清中含有多种促细胞生长因子和一些生物活性物质。
由于血清中含有一些不明成分,对于特殊目的细胞培养是不利的。为此,研究人员正在探索无血清培养细胞的条件,并已经取得一些进展。由于机体内的细胞生长通常需要不同的细胞因子进行调节,所以,在无血清培养时仍然需要添加必要的因子,包括促细胞生长因子(如EGF.,促贴附物(如层黏连蛋白)和其他活性物质(如转铁蛋白)。无血清培养排除了有血清培养时血清中不明因素的干扰,使实验结果更加可靠。
体外细胞培养必须模拟体内细胞生长的环境。环境因素主要是指无菌环境、合适的温度、一定的渗透压和气体环境。气体主要有两种,即O2和CO2。后者对于维持细胞培养液的酸碱度十分重要。
活体内生长的细胞所产生的代谢物和废物通过一定的系统进行利用和排除。体外培养细胞产生的代谢物和废物积累在培养液中,所以定期更换培养液,对于体外细胞培养也是至关重要的。
(3)【◆题库问题◆】:[名词解释] 传代培养
【◆参考答案◆】:
指当原代培养的细胞在培养瓶中生长、增殖到一定密度后,一分为二或以其他比例分装或转移到2个以上的培养瓶中所进行的再培养。
指当原代培养的细胞在培养瓶中生长、增殖到一定密度后,一分为二或以其他比例分装或转移到2个以上的培养瓶中所进行的再培养。
(4)【◆题库问题◆】:[名词解释] immunoblotting (免疫印迹)
【◆参考答案◆】:又称蛋白质印迹(Westernblotting),是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。该法是在凝胶电泳和固相免疫测定技术基础上发展起来的一种新的免疫生化技术。
(5)【◆题库问题◆】:[名词解释] homokaryon (同核融合细胞)
【◆参考答案◆】:由基因型相同的细胞融合而成的。
【◆参考答案◆】:C
(7)【◆题库问题◆】:[名词解释] negative staining(负染色技术)
【◆参考答案◆】:用重金属盐对铺展在载网上的样品染色,吸取多余染料,干燥后,使样品凹陷铺展上一层重金属盐,而凸出的地方没有染料沉积,从而负染效果;分辨率可达1.5nm左右。与金属投影染色背景,衬托出样品的精细结构
(8)【◆题库问题◆】:[问答题,简答题] 透射电镜与普通光学显微镜的成像原理有何异同?
【◆参考答案◆】:透射电镜与光学显微镜的成像原理基本一样,不同的是:1)透射电镜用电子束作光源,用电磁场作透镜,2)光学显微镜用可见光或紫外光作光源,以光学玻璃为透镜。
(9)【◆题库问题◆】:[问答题,简答题] 细胞融合有那几种方法?病毒诱导与PEG的作用机制有何不同?
【◆参考答案◆】:1)细胞融合的方法有四种:病毒法、聚乙二醇(PEG)法、电激和激光法。2)病毒诱导:是先足够数量的紫外灭活的病毒颗粒黏附在细胞膜上起搭桥作用,使细胞黏着成堆,细胞紧密靠近,同时细胞膜发生了一定的变化,在37℃温浴条件下,粘结部位的细胞膜破坏,形成通道,细胞质流通并融合,病毒颗粒也随之进入细胞。两个细胞合并,细胞发生融合;聚乙二醇(PEG)法:PEG使能改变各种细胞的末结构,使两细胞接触点处质膜的脂类分子发生疏散和重组,利用两细胞接口处双分子层质膜的相互亲何以彼此的表面张力作用,使细胞发生融合。
(10)【◆题库问题◆】:[名词解释] knockin (基因嵌入)
【◆参考答案◆】:又称基因置换,它是利用内源基因序列两侧或外面的断裂点,用同源序列的目的基因整个置换内源基因。